有机化工论文_基于红细胞的多功能药物传递系统

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摘要：文章目录 缩略词一览表 摘要 Abstract 前言 1 纤维肉瘤研究现状简介 2 长春新碱概述及应用 3 红细胞药物递送概述 4 立题依据 第一部分 RBC-VCR-NPs处方前研究 材料与方法 1 实验仪器 2 药品

文章目录

缩略词一览表

摘要

Abstract

前言

1 纤维肉瘤研究现状简介

2 长春新碱概述及应用

3 红细胞药物递送概述

4 立题依据

第一部分 RBC-VCR-NPs处方前研究

材料与方法

    1 实验仪器

    2 药品与试剂

    3 实验动物

    4 实验方法

结果

讨论

第二部分 载药纳米粒处方优化及表征

材料与方法

    1 实验仪器

    2 药品与试剂

    3 实验方法

结果

    1 星点设计-效应面法优化VCR-NPs的制备工艺

    2 VCR-NPs物理性质考察

讨论

第三部分 RBC-VCR-NPs的制备及表面功能化修饰

材料与方法

    1 实验仪器

    2 药品与试剂

    3 实验动物

    4 实验方法

结果

    1 NGR-RBC-VCR-NPs的表征

讨论

第四部分 NGR-RBC-VCR-NPs体外肿瘤靶向性研究及评价

材料与方法

    1 实验仪器

    2 药品与试剂

    3 实验动物

    4 实验方法

结果

    1 NGR-RBC-VCR-NPs细胞靶向实验

    2 体外HT-1080 细胞抗增殖实验

讨论

结论

参考文献

文献综述

参考文献

攻读学位期间取得的学术成果

致谢

文章摘要:目的纤维肉瘤是常见的恶性软组织肿瘤,目前治疗方式主要为手术切除,以化疗作为辅助治疗,但化疗药物口服吸收差,选择性低,易出现严重不良反应。为了减轻毒副作用,新型药物载体递送系统成为了研究热点。由于聚合物纳米粒（NPs）可以保护药物不被降解、提高药物利用率和控制药物释放等,已被广泛开发为药物载体;红细胞（RBC）因具有生物利用度高、生物相容性好和循环寿命长等优势,也被用于药物载体的研究。因此,本文旨在通过二者相结合的载药方式改善化疗药物对肿瘤的治疗效果。方法根据《中国药典》建立长春新碱（VCR）的HPLC检测方法,并对所建立的检测方法进行方法学验证。通过纳米沉淀法制备载VCR的DSPE-PEG₂₀₀₀-PLGA纳米粒（VCR-NPs）,以粒径和包封率作为评价指标,通过单因素考察选择合适的因素水平,并采用Box-Behnken效应面法对VCR-NPs的处方进行筛选,得到最优处方;同时对VCR-NPs的Zeta电位、外观形态、稳定性及体外释放特征等性质进行评价。通过单因素试验,以载药量作为评价标准,得到适合VCR-NPs与RBC的孵育条件;通过剪切力实验对RBC和VCR-NPs的处方用量比例进行筛选,采用流式细胞术检测确定最优处方;采用共孵育法将VCR-NPs孵育到红细胞（Red Blood Cells,RBC）表面制备红细胞-纳米粒复合物（RBC-VCR-NPs）,采用脂质插入法将靶头NGR插入到红细胞膜表面得到NGR-RBC-VCR-NPs,增强靶向性。用激光共聚焦显微镜观察RBC-VCR-NPs、NGR-RBC-VCR-NPs对细胞HT-1080的靶向情况;通过MTT法检测NGR-RBC-VCR-NPs、RBC-VCR-NPs、VCR体外抗HT-1080细胞的增殖能力。结果参考《中国药典》2015版已有VCR色谱条件,VCR浓度在12.5¹25μg/mL范围内线性关系为Y=0.0194 X-0.1184,r²=0.9991;低、中、高三个浓度的日内及日间精密度的RSD值均小于2%;不同浓度的重复性RSD值均小于2%;测定低、中、高三个浓度的VCR溶液的回收率在98.06%¹00.83%之间,且每个浓度的RSD值均小于2%。制备VCR-NPs的最优处方为丙酮2 mL,VCR用量4 mg,水相体积8 mL,DSPE-PEG₂₀₀₀-PLGA 40 mg;通过透射电镜观察VCR-NPs为类球形,大小均一;其平均粒径为167.5 nm、zeta电位为-26.4 mV,平均包封率为60.09%,平均载药量为3.21%;通过稳定性仪考察VCR-NPs在60 h内稳定性良好;VCR在12 h时累计释放了84.27%,而VCR-NPs在120 h累计释放了75.29%。RBC-NPs的最优孵育条件为在37oC下孵育1 h,通过体外施加剪切力的方法,结合磷脂酰丝氨酸暴露率实验结果,筛选的最优处方比例为V_纳米粒:V_RBC=6:1,NGR-RBC-NPs的平均载药量为0.531 mg/mL RBC。处理后红细胞健康状态良好,纳米粒被成功的连接在红细胞表面。用激光共聚焦显微镜观察到NGR-RBC-VCR-NPs对细胞HT-1080的靶向性明显高于RBC-VCR-NPs;MTT法的考察结果显示,与VCR组及RBC-VCR-NPs组相比,NGR-RBC-VCR-NPs组作用于HT-1080细胞的抗增殖能力显著增强,并且随着药物浓度的增加,NGR-RBC-VCR-NPs对肿瘤细胞的增殖抑制作用显著增强。说明NGR-RBC-VCR-NPs对肿瘤的靶向性显著增强,从而提高药物的治疗效果。结论通过纳米沉淀法制备VCR-NPs,包封率及载药量稳定,粒径较小,形态较均一圆整。将NPs与RBC共孵育构成RBC-VCR-NPs,红细胞状态良好,无明显损伤。并通过连接靶头,合成NGR-RBC-VCR-NPs提高载体对肿瘤细胞HT-1080的靶向性及抗增殖能力,可改善该药物VCR的治疗效果。

文章来源：《湖北科技学院学报》 网址: http://www.hbkjxyxb.cn/qikandaodu/2021/1110/735.html

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